|
Работа 8.10 Количественное определение дикамбы (банвела-Д, дианата) в растениях и в почве методом хроматографии в тонком слое Приборы и посуда: аппарат для встряхивания, сушильный шкаф, испаритель-концентратор, фотоэлектроколориметр, аппарат Шталя для приготовления пластинок, колбы Бунзена, воронка Бюхнера, камера для хроматографирования, вакуум-насос, пульверизаторы стеклянные, баня водяная, воронки делительные, стеклянные пластинки для хроматографии размером 1515 см. Для приготовления сорбционной массы на одну пластину смешивают предварительно просеянные 2,5 г силикагеля, 0,25 г серно-кислого кальция и 8,5 мл воды. После высушивания при комнатной температуре пластину активируют в течение часа при 105-110°С. Реактивы и растворы: силикагель КСК-2,5 с размером частиц не более 15 меш; кислота серная х.ч., 10%-й раствор (прил. 8.1); кальций серно-кислый ч.д.а., просушенный в сушильном шкафу при 150 °С в течение 6 ч; едкий натрий х.ч., 0,2%-й водный раствор; эфир серный х.ч.; фосфорно-вольфрамовая кислота ч.д.а., 40%-й водный раствор; натрий серно-кислый безводный ч.д.а.; спирт этиловый ректификат; бензол перегнанный; спирт н-пропиловый ч.д.а.; н-гексан х.ч.; хлорное железо, 1%-й водный раствор; стандартный раствор х.ч. дикамбы в этиловом спирте, 100 мкг/мл. Характеристика препарата: действующее вещество (метокси - 3,6 - дихлорбензойная кислота): С8Н6Cl2О3. Дикамба - белое кристаллическое вещество, без запаха, стабильное, негигроскопическое. Растворимость в воде при 25°С: кислоты - 0,15 г/100 мл, диметиламинной соли - 72 г/100 мл по к.э. Хорошо растворяется в спиртах, серном эфире, хлороформе и ацетоне; слабо - в петролейном эфире. Синонимы дикамбы - дианат, банвел Д. Гербицид мало токсичен для теплокровных, ЛД50 1040-1100 мг/кг. Принцип метода. Метод основан на извлечении дикамбы из пробы серным эфиром, очистке экстракта и хроматографировании в тонком слое силикагеля. Подвижным растворителем служит бензол - н-гексан - ледяная уксусная кислота в соотношении: 5 : 10 : 3. Пятна на пластинке обнаруживают после термического разложения дикамбы до 3,6-дихлорсалициловой кислоты, способной давать окрашенные комплексы с растворами солей трехвалентного железа. Чувствительность метода - 0,5 мкг при определении в тонком слое и 10 мкг в образце при последующем колориметрическом определении. Процент определения дикамбы - 85-95. Метод специфичен. Ход работы. гомогенизированный растительный материал (5-10 г естественной влажности или 1-5 г воздушно-сухого образца) помещают в колбу, заливают 50 мл 0,2%-го раствора едкого натра и встряхивают в течение 30 мин. Экстракт подкисляют путем добавления 10 мл 10%-го раствора Н2SО4. В колбу добавляют 10 мл 40%-го раствора фосфорно-вольфрамовой кислоты, тщательно перемешивают и через 20-30 мин отфильтровывают через плотный бумажный фильтр на воронке Бюхнера. Остаток на фильтре дважды промывают разбавленной серной кислотой по 10 мл. Общий фильтрат переносят в делительную воронку и экстрагируют трижды серным эфиром порциями по 50 мл. Эфирный экстракт высушивают над безводным сульфатом натрия. Обезвоженный экстракт выпаривают досуха в испарителе-концентраторе на водяной бане при температуре 40-50 °С. Остаток растворяют в 0,2-0,5 мл спирта. При экстрагировании почвы 20 г воздушно-сухой почвы, тщательно растертой и пропущенной через сито с ячейками 1 мм, помещают в колбу и заливают 100 мл дистиллированной воды и встряхивают в течение 30 мин. Почвенную суспензию подкисляют серной кислотой до рН 1,0 и после 20-минутного перемешивания фильтруют через плотный складчатый фильтр. Далее поступают так же, как описано выше при экстрагировании растительного образца, начиная со слов: «Остаток на фильтре дважды…». Хроматографирование. Спиртовый раствор остатка или эквивалентную часть количественно переносят при помощи мерного капилляра на пластинку для хроматографии, а рядом в качестве свидетеля наносят стандартный раствор, содержащий количество дикамбы, близкое к ожидаемому в образце. Хроматографируют в смеси бензол - н-гексан - ледяная уксусная кислота (5 : 10 : 3). Влажную пластину выдерживают в сушильном шкафу в течение 2 ч при 185-200°С. Для количественного определения содержания дикамбы пластинку опрыскивают 1%-м раствором хлорного железа. При этом получают оранжево-красные пятна, расположенные на одинаковом уровне со свидетелями и аналогичные им по цвету (Rf=0,71). Визуальное сравнение интенсивности окраски и размера пятен образцов и стандартных растворов дает представление о примерном содержании гербицида в образце. Количественное определение. Закрывают полоску пластинки, где расположены пробы (экстракты образцов), а остальную часть пластины опрыскивают 1%-м раствором хлорного железа. Установив по пятнам свидетеля местонахождение дикамбы в образце, снимают в этом месте слой сорбента, переносят его количественно в воронку Шотта и элюируют 5 мл н-пропилового спирта. К элюату добавляют 0,2 мл 1%-го раствора хлорного железа и через 30 мин колориметрируют на ФЭК в кювете 10 мм (светофильтр №2). В качестве раствора для сравнения применяют вытяжку из контрольного растительного или почвенного материала. Содержание дикамбы в образце определяют по калибровочному графику. Для построения калибровочного графика навески растительного материала (или почвы), не содержащего дикамбы, смешивают с определенными количествами стандартного раствора химически чистой дикамбы и проводят анализ аналогично описанному. По полученным данным колориметрических измерений строят график в интервалах от 10 до 100 мкг. |